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Réactifs et instruments pour l'immunologie, la biologie cellulaire et la biologie moléculaire.

Améliorer la Précision de l'ELISA : Le Rôle des Tampons de Blocage

Améliorez la précision de votre ELISA avec des tampons de blocage : essentiels pour réduire le bruit, augmenter la sensibilité et garantir des résultats fiables dans la détection des protéines.

Introduction

Le test immuno-enzymatique (ELISA) est une technique largement utilisée pour détecter et quantifier des protéines, des anticorps et des hormones. L'exactitude et la fiabilité des résultats de l'ELISA sont significativement influencées par le choix des tampons de blocage, qui empêchent les liaisons non spécifiques et réduisent le bruit de fond.

Les tampons de blocage sont essentiels pour prévenir les interactions non spécifiques entre les anticorps et la surface de la microplaque. Les liaisons non spécifiques peuvent entraîner une augmentation des signaux de fond, ce qui peut conduire à des faux positifs ou à une quantification inexacte des analytes cibles. Le rôle principal d'un tampon de blocage est de couvrir les sites de liaison non occupés sur la plaque, réduisant ainsi le bruit de fond et améliorant le rapport signal/bruit de l'essai (Huber et al., 2009).

Mécanisme d'action

Le principal mécanisme par lequel les tampons de blocage fonctionnent est la saturation des sites de liaison non occupés sur la phase solide (par exemple, les puits de microplaque). Après l'immobilisation des anticorps ou des antigènes de capture, des sites de liaison libres restent disponibles pour des interactions non spécifiques. Les tampons de blocage occupent ces sites, empêchant ainsi d'autres protéines ou anticorps de se lier de manière non spécifique.

Les tampons de blocage non seulement empêchent les liaisons non spécifiques, mais stabilisent également les biomolécules liées à la surface du puits. Cette stabilisation est cruciale pour maintenir l'intégrité et la fonctionnalité des protéines immobilisées lors des étapes ultérieures de l'essai. Des recherches ont montré que les agents de blocage peuvent réduire les changements conformationnels dans les protéines immobilisées, préservant ainsi leur activité et garantissant une détection précise (Xiao et al., 2012).

Avantages de l'utilisation de tampons de blocage en ELISA

Sensibilité accrue		Réduction de la liaison non spécifique

Stabilisation des protéines adsorbées		Réduction de la réactivité croisée

L'utilisation de tampons de blocage efficaces dans les protocoles ELISA offre de nombreux avantages, notamment une réduction des liaisons non spécifiques, une sensibilité accrue, une stabilisation des protéines, une flexibilité à travers les formats d'essai, une minimisation de l'encombrement stérique, une réduction de la réactivité croisée et une amélioration de la reproductibilité. Une gamme complète de tampons de blocage est proposée pour soutenir les flux de travail ELISA, garantissant des performances optimales, une réduction des interférences de fond et des résultats fiables.

References

Huber, D., Rudolf, J., Ansari, P., Galler, B., Führer, M., Hasenhindl, C., and Baumgartner, S., 2009. Effectiveness of natural and synthetic blocking reagents and their application for detecting food allergens in enzyme-linked immunosorbent assays. Analytical and bioanalytical chemistry, 394, pp.539-548.

Xiao, Y., and Isaacs, S.N., 2012. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and blocking with bovine serum albumin (BSA)—not all BSAs are alike. Journal of immunological methods, 384(1-2), pp.148-151.