Mix pour la qPCR
Le mix pour qPCR est un produit prêt à l'emploi dans lequel tous les composants sont déjà mélangés d'une manière optimisée. Des stabilisateurs supplémentaires sont ajoutés pour permettre un stockage à long terme.
La concentration des composants est parfaitement adaptée à la plupart des dosages.
Taq Polymerase
Une polymérase Taq HotStart est inactive à basse température (température ambiante). Le chauffage à 95 ° C active l'enzyme et l'amplification peut commencer. L'enzyme n'est active que lorsque l'ADN entier est dénaturé.
dNTPs / dUTPs
Certains kits contiennent un mélange de dNTPs et de dUTPs, d'autres ne contiennent que des dNTPs.
UNG
L'Uracil-N-Glycosylase est une enzyme qui hydrolyse tout l'ADN monocaténaire et double brin contenant des dUTPs.
ROX
Certains thermocycleurs nécessitent un mix contenant du colorant ROX pour la normalisation. C'est le cas pour les machines ABI et Eppendorf, et en option sur les machines Stratagene.
Fluorescéine
Pour certains thermocycleurs, la méthode de normalisation pour l'essai SYBR® Green utilise la fluorescéine pour créer un «fond virtuel».
MgCl2
MgCl2 est nécessaire pour la Transcriptase inverse et l'activité Taq. La concentration de MgCl2 dans MasterMixes est optimisée en fonction de la quantité de Taq et de la composition tampon.
Colorant coloré inerte
Certains tampons comprennent également un colorant coloré inerte, pour permettre la visualisation du tampon lors du chargement dans les puits. Ce colorant coloré n'a aucun effet sur la sensibilité de l'essai et est un outil de travail commode.
