Transcriptase inverse AMV
La transcriptase inverse du virus de la myéloblastose aviaire
(AMV pour Avian Myeloblastosis Virus) catalyse la polymérisation de l'ADN en
utilisant des matrices ADN, ARN ou des hybrides ARN: ADN. Elle nécessite une
amorce (les amorces d'ADN sont plus efficaces que les amorces d'ARN) ainsi que
des ions Mg2 + ou Mn2 +. L'enzyme possède une activité intrinsèque de la RNase
H. Les détergents non ioniques et les composés sulfhydryles stabilisent son activité
enzymatique in vitro.
La forme αβ mature, la
forme la plus active de la transcriptase inverse AMV, possède de multiples activités
enzymatiques comprenant une ADN polymérase ARN-dépendante, une ADN polymerase
ADN-dépendante, une RNase H et une activité de déroulement. La transcriptase
inverse AMV est utilisée pour la synthèse d'ADNc, pour la synthèse de premier
brin d'ADNc pour une utilisation dans des réactions d'amplification ultérieures
et pour le séquençage d'ADN didésoxy.
L'enzyme peut également être utilisée pour le séquençage
d'ARN, le marquage en 3 'des fragments d'ADN et la génération de sondes ss pour
des empreintes génomiques.
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