Les méthodes de détection chromogénique comme l’IHC utilisent souvent des enzymes conjuguées (à des anticorps dans le cas de l’IHC)  pour visualiser les interactions entre les épitopes et les anticorps. Il est donc nécessaire lorsque l’on utilise ce type de méthodes de détection de bloquer l’activité endogène des enzymes que l’on utilise pour la visualisation. Cette étape de blocage de l’activité enzymatique est appelée Quenching.

Par exemple, dans les protocoles qui utilisent la HRP ou la phosphatase alcaline (AP), il est nécessaire de bloquer l’activité des enzymes endogènes. Certains tissus comme le rein, le foie ou les zones vésiculaires contenant des cellules sanguines présentent une activité peroxydase endogène. Les solutions de blocage de l’activité peroxydase sont basées sur l’H2O2.

La phosphatase alcaline retrouvée dans les intestins, le rein, les tissus lymphoïdes et d’autres tissus peut être bloquée avec du Levamisole. La phosphatase alcaline retrouvée dans les intestins n’est pas bloquée par le Levamisole, dans ce cas il faut utiliser de l’acide acétique.