Substrats pour Western Blot

Le Western blot est une technique fondamentale en biologie moléculaire et en biochimie, largement utilisée pour la détection, l'analyse et la quantification de protéines spécifiques dans des mélanges complexes. Un élément essentiel de ce processus est le substrat, qui réagit avec un anticorps conjugué à une enzyme pour produire un signal détectable. Les substrats sont disponibles en différents types, chacun adapté à différents besoins expérimentaux, notamment les substrats chimioluminescents, colorimétriques et fluorescents. Cet article explore ces types de substrats, en soulignant leurs caractéristiques et leurs applications.

Types de substrats pour le Western blot

• Substrats chimioluminescents : Ces substrats produisent de la lumière grâce à une réaction chimique catalysée par des enzymes comme la peroxydase de raifort (HRP) ou la phosphatase alcaline (AP). La lumière émise est détectée à l'aide de systèmes d'imagerie ou de films.
• Substrats colorimétriques :  ces substrats produisent un précipité coloré visible lors de la réaction avec une enzyme. Le résultat peut être observé directement sur la membrane de transfert sans équipement d'imagerie supplémentaire.
• Substrats fluorescents :  ces substrats produisent des signaux fluorescents lorsqu'ils sont excités par des longueurs d'onde de lumière spécifiques. La fluorescence peut être capturée à l'aide de systèmes d'imagerie avancés.

Le choix du substrat dépend :

• Exigences de sensibilité : Les substrats chimioluminescents sont préférés pour détecter de minuscules quantités de protéines.

• Budget et accessibilité : Les supports colorimétriques sont économiques et nécessitent un équipement minimal.

• Objectifs expérimentaux : L’analyse multiplex nécessite souvent des substrats fluorescents.