Produits pour la PCR

La technique de PCR (pour Polymerase Chain Reaction) ou amplification en chaîne par polymérase est largement utilisé en biologie moléculaire. Le principe de la PCR est d’utiliser une enzyme, une polymérase, pour dupliquer en grand nombre une séquence d’ADN ou d’ARN connue, à partir d’une faible quantité. Ceci se fait par la répétition de cycles de transition de température. En règle générale, chaque cycle comprend 3 étapes : la dénaturation, l’hybridation et l’élongation.

La phase de dénaturation consiste à séparer les 2 brins d’ADN afin de préparer l’étape suivante. L’étape d’hybridation permet aux amorces sens et anti-sens de s’hybrider aux matrices d’ADN (les 2 brins séparés lors de la dénaturation). Le temps et la température de cette étape varient en fonction de la séquence des amorces. La phase d’élongation permet aux polymérases de synthétiser le brin complémentaire de l’ADN matrice. Ce nouveau brin est synthétisé à partir des dNTPs libres présents dans le milieu réactionnel. La durée de cette étape dépend de la longueur de la séquence à amplifier.

Il existe désormais différents types de PCR comme par exemple la PCR classique, la RT-PCR qui permet de se servir d’ARN comme point de départ en utilisant une transcriptase inverse, la PCR quantitative en temps réel ou qPCR qui permet de mesure la quantité d’ADN polymérisé à chaque cycle (en temps réel) grâce à un marqueur fluorescent.