Anticorps secondaires anti-lapin
Les anticorps secondaires anti-lapins sont des anticorps utilisés pour détecter et visualiser la présence d'anticorps primaires produits chez le lapin. Ils sont générés en immunisant un animal hôte avec une population groupée d'immunoglobulines (Ig) de l'espèce cible, en l'occurrence le lapin, puis en collectant et en purifiant les anticorps qui en résultent. Les anticorps secondaires anti-lapins sont disponibles dans des espèces hôtes telles que la chèvre, l'âne, la souris, le poulet et le mouton, et se présentent sous diverses formes conjuguées, notamment des anticorps non marqués, des conjugués enzymatiques (phosphatase alcaline (PA) ou peroxydase de raifort (HRP)) et de la biotine. Ils sont également disponibles sous forme d'IgG entières.
Le choix du bon anticorps secondaire anti-lapin pour une expérience dépend de plusieurs facteurs, notamment l'application, l'espèce hôte de l'anticorps primaire, l'isotype de l'anticorps secondaire, le type de conjugué et la pré-adsorption ou l'adsorption croisée. Les étapes suivantes peuvent aider à sélectionner le bon anticorps :
- Déterminer l'espèce hôte de l'anticorps primaire : L'anticorps secondaire doit être élevé contre l'espèce hôte utilisée pour générer l'anticorps primaire. Par exemple, si l'anticorps primaire est produit chez le lapin, il convient d'utiliser un anticorps secondaire anti-lapin produit chez une espèce différente du lapin, telle que la chèvre, l'âne ou la souris.
- Déterminer l'isotype de l'anticorps primaire : L'anticorps secondaire doit être dirigé contre la classe/l'isotype de l'anticorps primaire. Par exemple, si l'anticorps primaire est une IgG1 de souris, il convient d'utiliser une IgG anti-souris ou un fragment F(ab) moins spécifique d'IgG anti-souris.
- Choisir le type de conjugué : Les anticorps secondaires peuvent être marqués par une enzyme (peroxydase, phosphatase alcaline), par un fluorochrome (FITC, R-PE, Alexa-Fluor®) ou par la biotine. Le choix du type de conjugué dépend de l'application.
- Envisager la pré-adsorption ou l'adsorption croisée : La pré-adsorption ou l'adsorption croisée peut contribuer à réduire la liaison non spécifique. Par exemple, si l'anticorps primaire est produit chez le lapin, il est possible d'utiliser un anticorps secondaire anti-lapin qui a été pré-adsorbé contre d'autres espèces, telles que la souris ou l'homme.
- Vérifier la compatibilité avec l'essai : L'anticorps secondaire doit être compatible avec l'essai utilisé, tel que le Western blot ou l'immunohistochimie.
